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如何解決在攻擊菌制備過程中出現(xiàn)的問題
時間:2019-05-14 10:19來源: 作者:班德液氮罐 點擊:
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用原來的傳代法制備的攻擊菌不但菌種的消費大，而且因傳代培養(yǎng)基的不同而各批間的效價檢測結(jié)果會有差異。而液氮保存攻擊菌解決了以上的問題。自增壓液氮罐
試驗表明，將攻擊菌復蘇、傳代（3～9代）、分裝并保存在液氮中，攻擊菌仍然保持原有的生物學特性，符合《中華人民共和國藥典》〔K〕中攻擊菌的LD50為100~1000/MLD的要求，可用于無細胞百日咳效力檢定。
且有較好的穩(wěn)定性，該法制備的攻擊菌用于檢定可減少人力、物力并節(jié)省時間，降低生產(chǎn)成本，提高工作效率，并能使每批的檢定結(jié)果不因攻擊菌的變化而受影響。因同批制備的攻擊菌支間差異不顯著，從而更能準確地反映制品的真實效價結(jié)果。
在攻擊菌制備過程中，通過多次反復試驗取得了一些經(jīng)驗，現(xiàn)表述如下：
1、在制備過程中攻擊菌的濃度測定非常重要，制備過程嚴格控制不受污染，而且必須純菌檢查合格；
2、要注意在放入液氮前，一定要先緩凍，慢速冷卻會有充分的時間使細胞內(nèi)的水分向外滲出達到平衡，快速冷卻沒有充分的時間使細胞內(nèi)的水分向外滲出、脫水，加速細胞內(nèi)冰晶增大，使細胞處于損傷狀態(tài)或潛在的損傷狀態(tài)；自增壓液氮罐
3、快速加溫融化不會在解凍過程中其冰晶損傷細胞，因此解凍時一般在3 分鐘左右為宜。在生產(chǎn)實踐中需不斷積累經(jīng)驗、掌握操作技能，為提高制品質(zhì)量，在攻擊菌的應用上尚有待進一步改進。
試驗表明，將攻擊菌復蘇、傳代（3～9代）、分裝并保存在液氮中，攻擊菌仍然保持原有的生物學特性，符合《中華人民共和國藥典》〔K〕中攻擊菌的LD50為100~1000/MLD的要求，可用于無細胞百日咳效力檢定。
且有較好的穩(wěn)定性，該法制備的攻擊菌用于檢定可減少人力、物力并節(jié)省時間，降低生產(chǎn)成本，提高工作效率，并能使每批的檢定結(jié)果不因攻擊菌的變化而受影響。因同批制備的攻擊菌支間差異不顯著，從而更能準確地反映制品的真實效價結(jié)果。
在攻擊菌制備過程中，通過多次反復試驗取得了一些經(jīng)驗，現(xiàn)表述如下：
1、在制備過程中攻擊菌的濃度測定非常重要，制備過程嚴格控制不受污染，而且必須純菌檢查合格；
2、要注意在放入液氮前，一定要先緩凍，慢速冷卻會有充分的時間使細胞內(nèi)的水分向外滲出達到平衡，快速冷卻沒有充分的時間使細胞內(nèi)的水分向外滲出、脫水，加速細胞內(nèi)冰晶增大，使細胞處于損傷狀態(tài)或潛在的損傷狀態(tài)；自增壓液氮罐
3、快速加溫融化不會在解凍過程中其冰晶損傷細胞，因此解凍時一般在3 分鐘左右為宜。在生產(chǎn)實踐中需不斷積累經(jīng)驗、掌握操作技能，為提高制品質(zhì)量，在攻擊菌的應用上尚有待進一步改進。
