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細胞復蘇注意事項
時間:2020-05-27 09:06來源: 作者:班德液氮罐 點擊:
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注意事項：
1、注意無菌操作
2、細胞復蘇時融化凍存細胞速度要快，防止細胞損傷，細胞復蘇后的操作最好在適宜溫度中進行，減少冷凍保護劑對細胞的毒性。
3、為了避免復蘇過程中細胞液中有冰晶的出現(xiàn)，破壞細胞膜及細胞內(nèi)部結構。從液氮拿出來，要快速丟入37度水浴，等細胞液剛剛化完取出，加培養(yǎng)液稀釋。
4、細胞放入水浴中注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動，使其受熱均勻，并防止水浴時水進入細胞凍存管污染細胞。打開細胞凍存管之前要用酒精棉球將凍存管消毒并晾干。
5、液氮一定的危險性，打開液氮罐取出細胞時，要注意防凍，戴防凍手套，防護眼睛。
6、如果凍存管密封不嚴，液氮可被吸入。由于解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，將可能發(fā)生爆炸。復蘇過程中應蓋上恒溫水浴鍋的蓋。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的原因：
1、凍存細胞時消化時間過長，導致細胞復蘇時失去鐵壁能力。
2、細胞凍存液的質量不好也會導致細胞死亡。
3、凍存液的量加的太多也不好。
4、凍存的時候把DMSO混均勻，會有一些影響，但不會太大。
1、注意無菌操作
2、細胞復蘇時融化凍存細胞速度要快，防止細胞損傷，細胞復蘇后的操作最好在適宜溫度中進行，減少冷凍保護劑對細胞的毒性。
3、為了避免復蘇過程中細胞液中有冰晶的出現(xiàn)，破壞細胞膜及細胞內(nèi)部結構。從液氮拿出來，要快速丟入37度水浴，等細胞液剛剛化完取出，加培養(yǎng)液稀釋。
4、細胞放入水浴中注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動，使其受熱均勻，并防止水浴時水進入細胞凍存管污染細胞。打開細胞凍存管之前要用酒精棉球將凍存管消毒并晾干。
5、液氮一定的危險性，打開液氮罐取出細胞時，要注意防凍，戴防凍手套，防護眼睛。
6、如果凍存管密封不嚴，液氮可被吸入。由于解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，將可能發(fā)生爆炸。復蘇過程中應蓋上恒溫水浴鍋的蓋。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的原因：
1、凍存細胞時消化時間過長，導致細胞復蘇時失去鐵壁能力。
2、細胞凍存液的質量不好也會導致細胞死亡。
3、凍存液的量加的太多也不好。
4、凍存的時候把DMSO混均勻，會有一些影響，但不會太大。
